| 產(chǎn)品名稱 |
人胃癌組織源性原代成纖維細(xì)胞 |
| 商品貨號(hào) |
MZ-4284 |
| 組織來源 |
中國成年病人手術(shù)后的胃癌組織。 |
| 規(guī)格 |
5×105cells/T25培養(yǎng)瓶 |
| 生長特性 |
貼壁 |
| 細(xì)胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測陰性。 |
| 細(xì)胞描述 |
胃癌組織源性微環(huán)境由功能性上皮、細(xì)胞外基質(zhì)和間質(zhì)細(xì)胞三部分組成。 腫瘤微環(huán)境主要包括： 1、微環(huán)境是細(xì)胞基因不穩(wěn)定性的來源,可以誘發(fā)基因突變和DNA 損傷,并導(dǎo)致DNA 修 復(fù)通路失調(diào)； 2、許多有明確致癌作用的理化因素(慢性炎癥、化學(xué)致癌物等)是通過破壞微環(huán)境的組 織結(jié)構(gòu)、改變間質(zhì)細(xì)胞因子表達(dá)譜并重塑細(xì)胞外基質(zhì),從而刺激功能細(xì)胞發(fā)生惡變的； 3、腫瘤細(xì)胞生長、侵襲、轉(zhuǎn)移所需的氧、營養(yǎng)成分和生長刺激信號(hào)被認(rèn)為是來自于周 圍的間質(zhì)細(xì)胞； 4、在適當(dāng)?shù)奈h(huán)境中,惡性細(xì)胞可以被誘導(dǎo)恢復(fù)分化狀態(tài)； 5、細(xì)胞外基質(zhì)中存在的抗腫瘤成分,例如：腫瘤抑素(tumstatin)、內(nèi)皮抑素(endostatin)； 間質(zhì)細(xì)胞主要包括成纖維細(xì)胞、各種免疫細(xì)胞和血管／淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞；此外,腫瘤細(xì) 胞還可以合成、分泌到細(xì)胞外間隙中新的基質(zhì)成分。 |
| 細(xì)胞傳代步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 |
| 細(xì)胞復(fù)蘇步驟 |
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。 |
| 細(xì)胞凍存步驟 |
待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml完全培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
| 主要功能 |
1、成纖維細(xì)胞組織微環(huán)境中主要的間質(zhì)細(xì)胞,也是產(chǎn)生間質(zhì)細(xì)胞(例如Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ型膠 原與纖維連接蛋白)和組織蛋白酶的主要細(xì)胞,處于“基質(zhì)母細(xì)胞”的地位； 2、成纖維細(xì)胞是正常組織結(jié)構(gòu)的“守護(hù)者”,存在抑制周圍上皮細(xì)胞發(fā)生惡變的機(jī)制, 已發(fā)生癌變的細(xì)胞在正常成纖維細(xì)胞環(huán)境下也可以向正常細(xì)胞分化； 3、成纖維細(xì)胞還是上皮細(xì)胞增生、分化的“調(diào)控者”,成纖維細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)化后可以表達(dá) 多種細(xì)胞因子、粘附分子直接作用于上皮細(xì)胞,促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的發(fā)生、生長、血管生成、浸 潤與轉(zhuǎn)移。 |
