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WPE1-NA22
WPE1-NA22
規格:
貨期:
編號:B241828
品牌:Mingzhoubio

標準菌株
定量菌液
DNA
RNA

規格:
凍干粉
斜面
甘油
平板


產品名稱 WPE1-NA22
商品貨號 B241828
Organism Homo sapiens, human
Tissue prostate
Cell Type epithelial
Product Format frozen
Morphology epithelial
Culture Properties adherent
Biosafety Level 2  [Cells contain human HPV-18 viral DNA sequences]

Biosafety classification is based on U.S. Public Health Service Guidelines, it is the responsibility of the customer to ensure that their facilities comply with biosafety regulations for their own country.

Disease normal
Age 54 years
Gender male
Ethnicity Caucasian, White
Storage Conditions liquid nitrogen vapor phase
Karyotype The depositor reports that at passage 29, the cells were near diploid, 45, X, -Y. Loss of Y chromosome has been observed in prostate cancer.
Images
Derivation

WPE1-NA22 cells were derived from RWPE-1 cells (ATCC CRL-11609) after exposure to N-methyl-N-nitrosourea (MNU) RefWebber MM, et al. Human cell lines as an in vitro/in vivo model for prostate carcinogenesis and progression. Prostate 47: 1-13, 2001. PubMed: 11304724. Epithelial cells from the peripheral zone of a histologically normal adult human prostate were transfected with a plasmid carrying one copy of the human papilloma virus 18 (HPV-18) genome to establish the RWPE-1 cell line (ATCC CRL-11609).

Clinical Data
54 years
Caucasian
male
Antigen Expression
kallikrein 3, KLK3 (prostate specific antigen, PSA); Homo sapiens, expressed (upon exposure to androgen)
Receptor Expression
androgen receptor, expressed
Cellular Products
cytokeratin 18
cytokeratin 8
Tumorigenic Yes
Effects
Yes, in nude mice
Yes, the cells form colonies in soft agar (low efficiency)
Comments

WPE1-NA22 cells belong to a family of cell lines, referred to as the MNU cell lines, which are all derived from RWPE-1 cells after exposure to MNU. The larger family of cell lines, including RWPE-1 cells with a common lineage, mimics multiple steps in progression from normal epithelium to prostatic intra-epithelial neoplasia, and then to invasive cancer. 

The MNU cell lines, in order of increasing malignancy are: WPE1-NA22 (ATCC CRL-2849), WPE1-NB14 (ATCC CRL-2850), WPE1-NB11 (ATCC CRL-2851), and WPE1-NB26 (ATCC CRL-2852).

WPE1-NA22 cells cells show very low invasive ability in the in vitro Boyden chamber invasion assay RefWebber MM, et al. Human cell lines as an in vitro/in vivo model for prostate carcinogenesis and progression. Prostate 47: 1-13, 2001. PubMed: 11304724.

The depositor reports that the parent RWPE-1 cell line (ATCC CRL-11609) was screened for Hepatitis B and C, and human immunodeficiency viruses, and was found to be negative.

Complete Growth Medium The base medium for this cell line is provided by Invitrogen (GIBCO) as part of a kit: Keratinocyte Serum Free Medium (K-SFM), Kit Catalog Number 17005-042. This kit is supplied with each of the two additives required to grow this cell line (bovine pituitary extract (BPE) and human recombinant epidermal growth factor (EGF). To make the complete growth medium, you will need to add the following components to the base medium:
  • 0.05 mg/ml BPE - provided with the K-SFM kit
  • 5 ng/ml EGF - provided with the K-SFM kit. NOTE: Do not filter complete medium.
  • Subculturing Volumes used in this protocol are for 75 cm2 flask; proportionally reduce or increase amount of dissociation medium for culture vessels of other sizes.
    Note: Subculture cells before they reach confluence. Do not allow cells to become confluent.
    1. Remove and discard culture medium.
    2. Briefly rinse the cell layer with Ca++/Mg++ free Dulbecco's phosphate-buffered saline (D-PBS).
    3. Add 2.0 to 3.0 mL (to a T-25 flask) or 3.0 to 4.0 ml (to a T-75 flask) of 0.05% Trypsin - 0.53mM EDTA solution, diluted 1:1 with D-PBS, and place flask in a 37°C incubator for 5 to 8 minutes. Observe cells under an inverted microscope until cell layer is dispersed (usually within 5 to 10 minutes).
      Note: To avoid clumping do not agitate the cells by hitting or shaking the flask while waiting for the cells to detach.
    4. Add 6.0 to 8.0 mL of 0.1% Soybean Trypsin Inhibitor (or 2% fetal bovine serum in D-PBS), as appropriate, and aspirate cells by gently pipetting.
    5. Transfer cell suspension to centrifuge tube and spin at approximately 125 x g for 5 to 7 minutes.
    6. Discard supernatant and resuspend cells in fresh serum-free growth medium. Add appropriate aliquots of cell suspension to new culture vessels. An inoculum of 2 x 104 to 4 x 104 viable cells/cm2 is recommended.
    7. Incubate cultures at 37°C. We recommend that you maintain cultures at a cell concentration between 4 x 104 and 7 x 104cells/cm2.

    Note: Cells grown under serum-free or reduced serum conditions may not attach strongly during the 24 hours after subculture and should be disturbed as little as possible during that period.

    Subcultivation Ratio: A subcultivation ratio of 1:3 to 1:5 is recommended
    Medium Renewal: Every 48 hours

    Note: For more information on enzymatic dissociation and subculturing of cell lines consult Chapter 10 in Culture of Animal Cells, a Manual of Basic Technique by R. Ian Freshney, 3rd edition, published by Alan R. Liss, N.Y., 1994.

    Cryopreservation
    Complete growth medium supplemented with 15% fetal bovine serum and 10% (v/v) DMSO. Cell culture tested DMSO is available as ATCC® Catalog No. 4-X.
    Culture Conditions
    Temperature: 37°C
    Atmosphere: Air, 95%; Carbon dioxide (CO2), 5%
    Population Doubling Time 32 hours
    Name of Depositor MM Webber
    Year of Origin 1994
    References

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    Fleming, D.O., Richardson, J. H., Tulis, J.J. and Vesley, D., (1995) Laboratory Safety: Principles and Practice. Second edition, ASM press, Washington, DC.

    梅經理 17280875617 1438578920
    胡經理 13345964880 2438244627
    周經理 17757487661 1296385441
    于經理 18067160830 2088210172
    沈經理 19548299266 2662369050
    李經理 13626845108 972239479
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