人視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞（WERI-RB-1）介紹：人視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞（WERI-RB-1）介是1974年R.M. McFall 和 T.W. Sery建立的兩株人眼癌細胞系中的一株。 細胞能在Difco Bacto-Agar中存活但不形成克隆。 掃描電鏡顯示在表面囊泡，板狀偽足和微絨毛在數(shù)量上和頻率上的改變。 細胞分化研究，腫瘤治療的動物模型和生化評價都涉及這株細胞。

人視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞（WERI-RB-1）介特性：

1） 來源：視網(wǎng)膜

2） 形態(tài)：圓形細胞聚集成葡萄狀，懸浮生長

3） 含量：>1x106

4） 污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性

5） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

 運輸和保存

1）使用含有優(yōu)質(zhì)胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細胞。

2）收到細胞后，可在1000RPM，常溫條件下，離心5min后，于潔凈操作臺棄去上清，加入推薦使用的培養(yǎng)基后轉移至T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，傳代達到細胞生長狀態(tài)良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養(yǎng)步驟。

3）收到細胞后請拍照，3天內(nèi)如果發(fā)現(xiàn)污染，請及時拍照與我們聯(lián)系。

人視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞（WERI-RB-1）用途：僅供科研使用。

細胞接收后的處理：

1） 收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發(fā)給我們。

2） 請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態(tài)，酒精消毒瓶壁并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。

3） 將T25瓶中的細胞培養(yǎng)基離心后，去上清，添加6ml完全培養(yǎng)基，加入新的T25瓶中繼續(xù)培養(yǎng)。

4) 如果細胞長滿80%請及時進行細胞傳代.

5） 接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染，請及時與我們?nèi)〉寐?lián)系。

人視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞（WERI-RB-1）培養(yǎng)步驟

一．人視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞（WERI-RB-1）培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1） 準備RPMI-1640培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細胞處理：

1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至6ml。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%，即可進行傳代培養(yǎng)。

注：第一次傳代推薦傳代比例為1:2，以后傳代比例可根據(jù)客戶需要自己決定。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。

下面T25瓶為類；

1，細胞凍存時，取上清，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。

2，4min ，1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞，根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細胞密度1-2xE6/ml，每支凍存管凍存1ml細胞懸液，注意凍存管做好標識。

3，將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。