細胞培養環境主要要求：無菌無毒。

創造局部無菌最簡便的方法：使用超凈工作臺或生物安全柜。

細胞無菌室要求：

①密封的房間、有空調過濾機組和通風系統

②有更衣室、風淋室、緩沖間

③無菌室使用前后需經過紫外燈輻照30分鐘消毒殺菌

④人員、物品進入無菌室也需相應的消毒處理

根據空氣潔凈度不同，無菌室分為百級、千級、萬級、十萬級和三十萬級。根據2010版GMP規定，無菌室分為A級、B級、C級、D級。細胞培養過程中常用設備：

電子天平

結構簡單，稱量的原理和秤原理是一樣的，和秤不同的是，電子天平量程小，精準度高。

PH計

結構由機體和電極筆構成；電極筆內部參比液是3mol/L的氯化鉀，保護液是飽和氯化鉀溶液。

純水機

由過濾柱、反滲透膜、數顯控制板組成，純水機可制得蒸餾水和超純水。

高溫高壓滅菌鍋

滅菌原理：密閉環境，加熱產生水蒸汽，鍋內冷空氣經排氣閥排出后，關閉排氣閥，由于水蒸汽無法排出，鍋內壓力增加，沸點升高，形成高溫環境，菌體蛋白質變性，從而達到滅菌的效果。

二氧化碳培養箱

結構：與普通生化培養箱相比，增加了密封性，通入CO2氣體。CO2氣體由外接氣瓶連接。

注意事項：

①氣瓶上有兩個氣壓表，右邊氣壓表是指氣瓶內壓力，左邊氣壓表是進入到培養箱內氣壓。

②培養箱參數是設置好的，分別是37℃，5%CO2。

③培養箱內有飽和硫酸銅溶液水盆，應定期加入無菌水，定期更換飽和硫酸銅溶液。

倒置顯微鏡

結構：倒置顯微鏡與普通的光學顯微鏡在結構上相反，光圈在上面，物鏡在載物臺下面。

使用步驟：

①打開電源開關，調節光圈亮度

②避開物鏡用酒精棉球擦拭載物臺

③培養瓶或培養皿可以直接放在載物臺上觀察細胞

④使用結束后，光圈調至最暗，關上電源，蓋上防塵布。

超凈工作臺

超凈工作臺僅適于制備培養基和其他無菌試劑及培養非靈長類細胞

根據氣流方向分為水平流超凈工作臺和垂直流超凈工作臺，我們實驗室使用的超凈工作臺是垂直流超凈工作臺。

生物安全柜

根據氣流方向和排風系統分為三級生物安全柜，實驗室使用的是2級生物安全柜。

生物安全柜和超凈工作臺的區別：

生物安全柜能夠完全保護工作人員、樣品并防止交叉污染的發生；

超凈工作臺只是保護操作對象而不保護工作人員和實驗室環境的潔凈工作臺。

液氮罐

液氮罐一般分為液氮貯存罐和液氮運輸罐。

主要用于低溫貯藏細胞和菌株凍存管，液氮溫度低至-196℃，使用過程需做好防護措施。

超低溫冰箱

本實驗室超低溫冰箱主要用于細胞、菌株凍存及短期保藏，設置溫度為-80℃，高溫報警溫度為-73℃，低溫報警溫度為-85℃。