一、產(chǎn)品簡介

1. 產(chǎn)品名稱：人關(guān)節(jié)滑膜成纖維細胞

2. 組織來源：關(guān)節(jié)

3. 產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

4. 細胞簡介：

滑膜是關(guān)節(jié)囊的內(nèi)層，淡紅色，平滑閃光，薄而柔潤，由疏松結(jié)締組織組成。關(guān)節(jié)腔內(nèi)的所有結(jié)構(gòu)，除關(guān)節(jié)軟骨、半月軟骨板以外,即便是通過關(guān)節(jié)腔的肌腱、韌帶等均全部為滑膜所包裹。滑膜分泌滑液，在關(guān)節(jié)活動中起重要作用。正常滑膜分為兩層，即薄的細胞層(內(nèi)腔層)和血管層(內(nèi)膜下層)，是血管豐富的關(guān)節(jié)囊內(nèi)膜，貼附于非關(guān)節(jié)面部分，覆蓋于關(guān)節(jié)囊內(nèi)的骨面上，不在軟骨面上，此部分稱為邊緣區(qū)或“裸區(qū)”。滑膜呈粉紅色，光滑發(fā)亮、濕而潤滑，有時可見絨毛，內(nèi)含膠原性纖維。
滑膜細胞有A、B兩型。巨噬細胞樣A型細胞，表面有絲狀偽足、漿膜內(nèi)陷、囊泡、線粒體、溶酶體、胞漿纖維和高爾基體，具有吞噬功能；B型成纖維樣滑膜細胞(FLS) ，有高濃度的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)結(jié)構(gòu)，是介導 RA 關(guān)節(jié)破壞的主要細胞。

本公司生產(chǎn)的人關(guān)節(jié)滑膜成纖維細胞采用膠原酶灌注消化法后，再用膠原酶-DNA酶聯(lián)合消化，細胞總量約為5×105cells/瓶；細胞經(jīng)纖維連接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）免疫熒光染色為陽性，純度可達80%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

5.推薦培養(yǎng)基：

我們推薦使用原代成纖維細胞培養(yǎng)體系作為體外培養(yǎng)人關(guān)節(jié)滑膜成纖維細胞的培養(yǎng)基。

二、細胞培養(yǎng)狀態(tài)

發(fā)貨時發(fā)送細胞電子版照片

三、使用方法 

在技術(shù)部標準操作流程下，人關(guān)節(jié)滑膜成纖維細胞可傳5~8代；建議您收到細胞后盡快進行相關(guān)實驗。 

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。 

1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶，用75%酒精消毒瓶身，拆下封口膜，放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。 

2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。 

3. 細胞傳代 

1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次； 

2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培養(yǎng)瓶中，輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后，吸出多余胰蛋白酶消化液，37℃溫浴1-3min；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后，再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化； 

3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2-1:3適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)； 

4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察；之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。 

四、注意事項 

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。 

2. 在細胞培養(yǎng)過程中，請注意保持無菌操作。 

3. 傳代培養(yǎng)過程中，胰酶消化時間不宜過長，否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。 

4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態(tài)，便于和技術(shù)部溝通；由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時和我們聯(lián)系，詳盡告知細胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。 

5. 該細胞只可用于科研。 

 備注：由于實驗所用試劑、操作環(huán)境及操作手法的不同，以上方法僅供各實驗室參考